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Endo培養基的使用方法和現象

徐永利
錄入時間:2024-8-21 10:01:53 來源:青島海博生物

一、用途

  用于濾膜法測定生活飲用水及其水源水中的總大腸菌群。


二、培養基配方(g/L):

蛋白胨

10.0

磷酸二氫鉀

2.5

乳糖

10.0

無水亞硫酸鈉

3.3

堿性品紅

0.3

瓊脂

12.5

pH7.4±0.2 25℃

  此配方可以進行改良或增加營養成分以獲得最佳的結果。


三、試驗原理:

  蛋白胨提供氮源、維生素、氨基酸和碳源;磷酸二氫鉀是緩沖劑;乳糖是大腸菌群可發酵的糖類;堿性品紅為指示劑,具有醌式結構,呈深紅色,亞硫酸鈉能將堿性品紅還原,使其褪色,所以制成的培養基呈淡粉紅色;發酵乳糖的細菌產生乙醛,與亞硫酸鈉結合,可恢復堿性品紅的醌式結構,所以菌落呈深紅色;沙門氏和志賀氏菌屬細菌不發酵乳糖,故菌落與培養基同為淡紅色或無色;瓊脂是培養基的凝固劑。


四、試驗方法:

  1. 稱取本品39.0g,加入20ml無水乙醇和980ml蒸餾水中加熱攪拌溶解,分裝,121℃高壓滅菌15分鐘,備用。

  2. 制備質控菌液,選擇合適稀釋度的目標菌質控菌液0.1ml,均勻涂布于待測平板以及參比平板上,每一稀釋度接種兩個平板。

  3. 用1μL接種環取非目標菌質控菌液1環,將接種環接觸容器邊緣3次去除多余液體,在平板表面劃六條平行直線,同時接種兩個平板。

  4. 36±1℃倒置培養基培養24±2小時,記錄實驗結果。


五、試驗結果:

  接種以下質控菌株,36±1℃需氧培養22-26小時:

質控菌株

菌株編號

接種量(CFU)

參比或計數

培養基

方法

質控評定標準

其他特征

金黃色葡萄球菌

ATCC6538

/

/

半定量

G≤1

/

大腸埃希氏菌

ATCC25922

20-200

TSA

定量

PR≥0.5

紫紅色菌落,有金屬光澤

產氣腸桿菌

CMCC(B)45103

20-200



PR≥0.5

紫紅色菌落

陰溝腸桿菌

ATCC23355

20-200



PR≥0.5

紫紅色菌落,有金屬光澤

弗氏檸檬酸桿菌

ATCC43864

20-200



PR≥0.5

紫紅色菌落,有金屬光澤

傷寒沙門氏菌

ATCC14028

20-200



PR≥0.5

無色菌落


圖1  Endo培養基微生物質控結果

備注:a:陰溝腸桿菌,b:弗氏檸檬酸桿菌,c:產氣腸桿菌,d:大腸埃希氏菌,e:沙門氏菌,f:金黃色葡萄球菌


六、方法的局限性:

  本培養基僅為細菌鑒定的一部分,需做其他補充試驗。


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注:本文屬海博生物原創,未經允許不得轉載。

 

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