一、用途
用于濾膜法測定生活飲用水及其水源水中的總大腸菌群。
二、培養基配方(g/L):
蛋白胨 |
10.0 |
磷酸二氫鉀 |
2.5 |
乳糖 |
10.0 |
無水亞硫酸鈉 |
3.3 |
堿性品紅 |
0.3 |
瓊脂 |
12.5 |
pH7.4±0.2 25℃ |
此配方可以進行改良或增加營養成分以獲得最佳的結果。
三、試驗原理:
蛋白胨提供氮源、維生素、氨基酸和碳源;磷酸二氫鉀是緩沖劑;乳糖是大腸菌群可發酵的糖類;堿性品紅為指示劑,具有醌式結構,呈深紅色,亞硫酸鈉能將堿性品紅還原,使其褪色,所以制成的培養基呈淡粉紅色;發酵乳糖的細菌產生乙醛,與亞硫酸鈉結合,可恢復堿性品紅的醌式結構,所以菌落呈深紅色;沙門氏和志賀氏菌屬細菌不發酵乳糖,故菌落與培養基同為淡紅色或無色;瓊脂是培養基的凝固劑。
四、試驗方法:
1. 稱取本品39.0g,加入20ml無水乙醇和980ml蒸餾水中加熱攪拌溶解,分裝,121℃高壓滅菌15分鐘,備用。
2. 制備質控菌液,選擇合適稀釋度的目標菌質控菌液0.1ml,均勻涂布于待測平板以及參比平板上,每一稀釋度接種兩個平板。
3. 用1μL接種環取非目標菌質控菌液1環,將接種環接觸容器邊緣3次去除多余液體,在平板表面劃六條平行直線,同時接種兩個平板。
4. 36±1℃倒置培養基培養24±2小時,記錄實驗結果。
五、試驗結果:
接種以下質控菌株,36±1℃需氧培養22-26小時:
質控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
參比或計數 培養基 |
方法 |
質控評定標準 |
其他特征 |
金黃色葡萄球菌 |
ATCC6538 |
/ |
/ |
半定量 |
G≤1 |
/ |
大腸埃希氏菌 |
ATCC25922 |
20-200 |
TSA |
定量 |
PR≥0.5 |
紫紅色菌落,有金屬光澤 |
產氣腸桿菌 |
CMCC(B)45103 |
20-200 |
|
|
PR≥0.5 |
紫紅色菌落 |
陰溝腸桿菌 |
ATCC23355 |
20-200 |
|
|
PR≥0.5 |
紫紅色菌落,有金屬光澤 |
弗氏檸檬酸桿菌 |
ATCC43864 |
20-200 |
|
|
PR≥0.5 |
紫紅色菌落,有金屬光澤 |
傷寒沙門氏菌 |
ATCC14028 |
20-200 |
|
|
PR≥0.5 |
無色菌落 |
圖1 Endo培養基微生物質控結果
備注:a:陰溝腸桿菌,b:弗氏檸檬酸桿菌,c:產氣腸桿菌,d:大腸埃希氏菌,e:沙門氏菌,f:金黃色葡萄球菌
六、方法的局限性:
本培養基僅為細菌鑒定的一部分,需做其他補充試驗。
相關產品:
注:本文屬海博生物原創,未經允許不得轉載。
下一篇:甘油生化管的原理和使用方法